一、復蘇
1.把凍存管從液氮中取出來，當即投入37℃水浴鍋中，細微搖擺（留意防止蓋子不緊致使液體進入凍存管）。液體都消融后(大概1-1.5分鐘)，拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。
2.把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基的15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來)，1000轉離心5分鐘。
?
3.把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的10cm培養(yǎng)皿中前后左右輕輕搖擺，使培養(yǎng)皿中的細胞均勻分布。
4.標好細胞品種和日期、培養(yǎng)人姓名等，放到37℃的5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。
5.依據(jù)細胞增長速度2-3天換一次培養(yǎng)基。
二、傳代
1.培養(yǎng)皿中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加恰當?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細胞都變圓后參加等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細胞，讓細胞懸浮起來。
6.把細胞吸到10ml或15ml的離心管中，1000轉離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細胞都吹起來。
8.依據(jù)細胞品種把細胞傳到幾個培養(yǎng)皿中。一般，癌細胞分5個，正常細胞傳3個。持續(xù)培養(yǎng)。
三、凍存
把細胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細胞品種，凍存日期。4℃30min，-20℃30min，-80℃過夜，然后放到液氮灌中保存。
我司通過不斷的試驗優(yōu)化和改進，積累了大量的經(jīng)驗，具有專業(yè)的科研團隊，為便利客戶，我司供給專業(yè)的ELISA代測技術服務，凡購買本公司試劑盒，咱們免費代測！咱們信任公司將會永bu停止探究和開展的腳步，和我國國內(nèi)以及性大公司同步開展。
上海晶抗生物工程有限公司
地址：上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號9幢2441室
版權所有：上海晶抗生物工程有限公司 備案號：滬ICP備16026504號-5 總訪問量：675852 站點地圖 技術支持：智慧城市網(wǎng) 管理登陸
